Một số kĩ thuật trong sinh học phân tử
Kỳ thi ĐGTD ĐH Bách Khoa
Phương pháp PCR thực hiện qua nhiều chu kỳ, mỗi chu kỳ gồm bao nhiêu giai đoạn:
Phương pháp PCR thực hiện qua nhiều chu kỳ, mỗi chu kỳ gồm 3 giai đoạn:
- Giai đoạn biến tính: ủ ADN ban đầu ở nhiệt độ cao: 92 - 95 độ C để tách ADN thành sợi đơn.
- Giai đoạn lai ghép: ADN mồi được lai ghép với sợi đơn của ADN ban đầu. Thực hiện ở nhiệt độ: 50 - 52 độ C.
- Giai đoạn tổng hợp ADN: Taq polymerase điều khiển sự gắn tiếp các Nu vào sau ADN mồi dựa ADN ban đầu làm khuôn. Thực hiện ở nhiệt độ: 70 - 72 độ C. Sau mỗi chu kỳ, từ một phân tử ADN ban đầu tổng hợp nên hai phân tử ADN, đến chu kỳ sau hai phân tử này lại làm khuôn để tổng hợp nên 4 phân tử ADN.
Giai đoạn tổng hợp DNA, được thực hiện ở nhiệt độ:
Giai đoạn tổng hợp ADN: Taq polymerase điều khiển sự gắn tiếp các Nu vào sau ADN mồi dựa ADN ban đầu làm khuôn. Thực hiện ở nhiệt độ: 70 – 72 độ C
Giai đoạn lai ghép, được thực hiện ở nhiệt độ:
Giai đoạn lai ghép: ADN mồi được lai ghép với sợi đơn của ADN ban đầu. Thực hiện ở nhiệt độ: 50 – 52 độ C
Giai đoạn biến tính, được thực hiện ở nhiệt độ:
Giai đoạn biến tính: ủ ADN ban đầu ở nhiệt độ cao: 92 - 95 độ C để tách ADN thành sợi đơn.
Kỹ thuật nào cho phép làm tăng số lượng bản sao của một đoạn ADN có sẵn
(I) Phản ứng khuếch đại gen PCR.
(II) Tách dòng đoạn ADN vào plasmit sau đó biến nạp vào tế bào vi khuẩn
(III) Điện di đoạn ADN trong điện trường
(IV) Cắt bằng enzim giới hạn
Kỹ thuật cho phép làm tăng số lượng bản sao của một đoạn ADN có sẵn là khuếch đại gen PCR và tách dòng đoạn ADN vào plasmit sau đó biến nạp vào tế bào vi khuẩn.
