Trong kỹ thuật chuyển gen nhờ thể truyền là plasmit, người ta phải thực hiện hai thao tác cắt vật liệu di truyền là cắt mở vòng plasmit và cắt lấy gen cần chuyển bằng enzim cắt giới hạn. Số loại enzim cắt giới hạn cần dùng để tạo ra một phân tử ADN tái tổ hợp là:

Kĩ thuật tạo tế bào lai  

Kĩ thuật nối gen

Kĩ thuật cắt mở vòng plasmid

Kĩ thuật tạo ADN tái tổ hợp

Restrictaza

ligaza

amilaza

ADN polimeraza

Virut hoặc vi khuẩn.

Plasmit hoặc vi khuẩn.

Virut hoặc plasmit.

Plasmit hoặc nấm men.

Để chuyển ADN tái tổ hợp vào tế bào được dễ dàng.

Vì plasmit phải có các gen này để có thể nhận ADN ngoại lai.

Để giúp enzyme restrictaza cắt đúng vị trí trên plasmit

Để dễ dàng phát hiện ra các tế bào vi khuẩn đã tiếp nhận ADN tái tổ hợp

Nếu không có thể truyền plasmit thì các gen của tế bào nhận không phiên mã được.

Nhờ có thể truyền plasmit mà gen cần chuyển gắn được vào ADN vùng nhân của tế bào nhận.

Nếu không có thể truyền plasmit thì gen cần chuyển sẽ tạo ra quá nhiều sản phẩm trong tế bào nhận.

Nhờ có thể truyền plasmit mà gen cần chuyển được nhân lên trong tế bào nhận.

Chọn thể truyền có các gen chỉ thị đặc hiệu để nhận biết.

Dùng Canxi clonia làm giãn màng tế bào hoặc dùng xung điện.

Dùng xung điện để thay đổi tính thấm của màng tế bào đối với axit nucleic.

Dùng phương pháp đánh dấu bằng đồng vị phóng xạ.

Có khởi điểm cho quá trình tái bản.

Có gen đánh dấu để nhận biết sau khi chuyển gen.

Có trình tự đặc hiệu cho sự nhận biết của enzym cắt giới hạn.

Tất cả các ý trên